
1.無菌箱或超凈臺
(1)無菌箱若無菌操作的工作量不大,可不利用無菌室殺菌后操作,而使用無菌箱。無菌箱置于潔凈的房間內,也可放在無菌室。無菌箱由專業廠生產,其材質為有機玻璃。正面有2個手孔,上面裝有袖套;左面有物料進出的孔,以轉動孔門的螺紋而開閉;箱頂裝有照明燈、紫外燈,并設裝有過濾介質的通氣柱。
(2)超凈臺設有一套空氣層流裝置。屋內的空氣經預過濾器,由風機送人加壓箱,再通過超細玻璃纖維后,進入均壓層,以水平層流恒速流至操作區。
超凈臺由專業廠生產,有單人或雙人操作2種,可按需選購。其氣流速度為0.3~0.5m/s,空氣凈化率能達99. 95%以上,可放置于潔凈的室內,使用時臺上盡可能少放物品,以免干擾空氣層流;也需定期檢查無菌效果。超凈臺適用于釀酒酵母及細菌的操作,對于帶孢子的霉菌則未必適用,因孢子經空氣吹動會飛揚。
2.接種用具
接種用具為若干接種針及1盞酒精燈。
接種針由針部和桿部組成。針部可為23號鉑絲,但其質地較軟;也可用粗細適當的電爐絲代替,但在操作時應注意其散熱較慢的特點。桿部可采用市售的金屬接種棒,可將針部插入,用螺帽夾緊,也可隨時取下針部;或以長20cm左右、粗細合適的銅棒為桿部,用小鉆子在其一端中央鉆1個小孔后,再將電爐絲插入孔內,然后用小錘砸牢;也有用玻璃作桿部的,將長約7cm的電爐絲的一端用鑷子夾住,把另一端插入在酒精燈上加熱而融軟的玻璃棒內。以金屬為桿部時,應在手握到的部位包以絕熱材料。
針部的一端可做成直徑約2mm的圓環,稱為環狀,常用于液態種子的微量移植;針端呈針狀,常用于平板菌體與固態試管培養基或固態試管培養基與試管固態原菌之間的轉接;針端呈鉤狀,一般用于轉接固態的霉菌等菌絲體。使用后的接種針,可放人盛有酒精的量筒內。
若移植較多的液態菌體,則需無菌吸管。吸管的玻璃部分可預先用牛皮紙包好后進行干熱滅菌;橡皮吸頭部分,可泡于酒精內,待使用時取出。
3.高壓滅菌鍋
(1)小容量高壓滅菌鍋可以煤氣或電等為熱源。
(2)容量較大的高壓滅菌鍋 可用蒸汽為熱源?蓪υ诟邏合虏粫写笞兓呐囵B基及玻璃儀器進行滅菌。有芽孢的細菌,以70kPa的蒸汽滅菌20min,或98kPa的蒸汽滅菌15min,即可完全殺滅。
滅菌鍋必須安裝壓力表和安全閥,安全閥要經常檢查,以免生銹失效。在使用高壓鍋滅菌時,一定要將鍋內的冷空氣排盡,以免造成壓力表的指示壓力已到規定值而鍋內溫度較低的假象;滅菌結束后,要緩慢地或間歇式進行排氣,以免降壓太快而使液態培養基噴染棉塞。
通常每個廠應置備上述2種容量不同的高壓滅菌鍋,可根據平時的實際需要輪換使用。
若無高壓滅菌鍋,可用100℃的常壓蒸汽滅菌3次,即1天1次。其原理是對于普通不形成芽孢的細菌,經100℃蒸汽滅菌30min即可全部殺滅;但芽孢桿菌則難以殺滅,然而第1次未殺死的芽孢桿菌,在30~37℃下,第2次即能變為營養體,可被第2次的常壓蒸汽殺滅。如此3次常壓滅菌,即可保證殺菌安全,稱為間歇式滅菌法。
4.干熱滅菌箱
干熱滅菌箱設有雙層門;有2組電熱絲,分別用以升溫和恒溫;箱頂有氣孔,若用于干燥,則應配有小的風機。使用時,應經常注意該設備的恒溫裝置是否失靈,以免升溫過高而引起火災。
將需滅菌的已塞棉塞的試管、三角瓶,或用牛皮紙包好的培養皿等玻璃用具,放入干熱滅菌箱內,注意不要使棉塞或紙接觸箱壁。以免棉塞和報紙發黃、燃燒或紙變脆而破裂。在滅菌過程或滅菌結束未降溫時,不宜打開箱門,以免引起紙、棉塞燃燒和玻璃儀器破裂。
5.培養箱
培養箱又稱恒溫箱或保溫箱,使用時也應經常注意溫度控制系統是否失靈。
6.冰箱
冰箱用于存放菌種及無菌培養基,注意不要放液態而敞口的物品,以免液體蒸發,使菌種的棉塞受潮而容易污染雜菌。
7.顯微鏡
白酒廠所用的顯微鏡為光學顯微鏡,使用時應嚴格按說明書的內容操作。
上述設備及儀器的說明書,應由專人保管,別人借閱后須及時交還;或將說明書用粗線繩串起來,掛于安置設備或儀器的墻上,便于查閱。
8.玻璃器皿
(1)試管 不要使用翻口的試管。試管的長度通常為其直徑的10倍。如18mm×180mm的試管,通常用于液態培養或盛倒平板用的固態培養基;15mm×150mm的試管,可裝酵母和細菌培養用的斜面培養基;lOmm×lOOmm者,用于生理試驗或保存原菌。
(2)培養皿 培養皿以其直徑分為6cm、9cm、12cm、15cm、18cm、21cm等多種。
一般分離酵母或細菌時多使用直徑為9cm培養皿,因其操作方便且不易污染雜菌;分離霉菌等產生大量菌絲及孢子的微生物時,可采用較大的培養皿。
(3)三角瓶又名錐形瓶。它以其容量定規格,應選用帶有刻度的三角瓶。
(4)其他常用的載玻片,其大小為7.5cm x2.5cm×(0.1—0.13) cm;蓋玻片為1.8cm×1.8cm,蓋玻片有厚薄之分,薄片用于鏡檢,厚片用于血球計數計測細胞數。 涂布器:用于菌種分離及平板活菌計數時涂布平板培養基,可用直徑為3—4mm、長25cm的玻璃棒,在酒精噴燈上將其一端彎成每邊長為3cm的等邊三角形,再把該三角形平面與柄彎成140°的角即可。