進行菌種培養的廠家，應設置符合微生物操作相關要求的顯微鏡檢查室、微生物培養室、培養基制備室、菌種保藏室、無菌室及保溫室等，一般酒廠可一室多用。

　　無菌室一般是在微生物實驗室內專辟一個小房間。可以用板材和玻璃建造。面積不宜過大，4~5m2即可，高2.5m左右。無菌室外要設一個緩沖間，緩沖間的門和無菌室的門不要朝向同一方向，以免氣流帶進雜菌。無菌室和緩沖間都必須密閉。室內裝備的換氣設備必須有空氣過濾裝置。無菌室內的地面、墻壁必須平整，不易藏污納垢，便于清洗。工作臺臺面應該處于水平狀態。無菌室和緩沖間都裝有紫外線燈，無菌室和紫外線燈距離工作臺面1m。工作人員進入無菌室應穿滅過菌的服裝，戴帽子。

　　無菌室的具體要求如下：

　　(1)無菌室應設有無菌操作間和緩沖間，無菌操作間潔凈度應達到10000級，室內溫度保持在20~24℃，濕度保持在45%~60%。超凈臺潔凈度應達到100級。

　　(2)無菌室應保持清潔，嚴禁堆放雜物，以防污染。

　　(3)嚴防一切滅菌器材和培養基污染，已污染者應停止使用。

　　(4)無菌室應備有工作濃度的消毒液，如5%的甲醛溶液，70%的酒精溶液，0.1%的新潔爾滅溶液等。

　　(5)無菌室應定期用適宜的消毒液滅菌清潔，以保證無菌室的潔凈度符合要求。

　　(6)需要帶人無菌室使用的儀器、器械、平皿等一切物品，均應包扎嚴密，并應經過適宜的方法滅菌。

　　(7)工作人員進入無菌室前，必須用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在緩沖間更換專用的工作服、鞋、帽子、口罩和手套（或用70%的酒精再次擦拭雙手），方可進入無菌室進行操作。

　　(8)無菌室使用前必須打開無菌室的紫外燈輻照滅菌30min以上，并且同時打開超凈臺進行吹風。操作完畢，應及時清理無菌室，再用紫外燈輻照滅菌20min。

　　(9)供試品在檢查前，應保持外包裝完整，不得開啟，以防污染。檢查前，用70%的酒精棉球消毒外表面。

　　(10)每次操作過程中，均應做陰性對照，以檢查無菌操作的可靠性。

　　(11)吸取菌液時，必須用洗耳球吸取，切勿直接用口接觸吸管。

　　(12)接種針每次使用前后，必須通過火焰灼燒滅菌，待冷卻后，方可接種培養物。

　　(13)帶有菌液的吸管、試管、培養皿等器皿應浸泡在盛有5%來蘇爾溶液的消毒桶內消毒，24h后取出沖洗。

　　(14)如有菌液灑在桌上或地上，應立即用5%石炭酸溶液或3%的來蘇爾傾覆在被污染處至少30min，再做處理。工作衣帽等受到菌液污染時，應立即脫去，高壓蒸汽滅菌后洗滌。

　　(15)凡帶有活菌的物品，必須經消毒后，才能在水龍頭下沖洗，嚴禁污染下水道。

　　(16)無菌室應每月檢查菌落數。在超凈工作臺開啟的狀態下，取內徑90mm的無菌培養皿若干，無菌操作分別注入融化并冷卻至約45℃的營養瓊脂培養基約15mL，放至凝固后、倒置于30~35℃培養箱培養48h，證明無菌后，取平板3～5個，分別放置工作位置的左中右等處，開蓋暴露30min后，倒置于30~35℃培養箱培養48h，取出檢查。100級潔凈區平板雜菌數平均不得超過1個菌落，10000級潔凈室平均不得超過3個菌落。如超過限度，無菌室進行徹底消毒，直至重復檢查合乎要求為止。

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